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退火温度怎么确定高低(退火温度怎么确定)

  导读 大家好,小皮来为大家解答以上问题。退火温度怎么确定高低,退火温度怎么确定这个很多人还不清楚,现在一起跟着小编来瞧瞧吧! 1、退火温度

  大家好,小皮来为大家解答以上问题。退火温度怎么确定高低,退火温度怎么确定这个很多人还不清楚,现在一起跟着小编来瞧瞧吧!

  1、

  退火温度的计算公式为:4 (g+c)+2 (a+t)-(5 ~ 8)。

  2、

  AnnealingTemperature是引物和模板结合时的温度参数,是50%的引物和互补序列为双链DNA分子时的温度。

  3、

  它是影响PCR特异性的重要因素。

  4、

  理想情况下,退火温度应足够低以确保引物与靶序列的有效退火,并足够高以减少非特异性结合。

  5、

  合理的退火温度为55 ~ 70。

  6、

  退火温度一般设定在比底漆的Tm低5。

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